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维生素C含量测定方法ppt课件

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组员:丁超凡 韩丹丹 郭珊 韩双 付文静 1 维生素C(Vitamin C ,Ascorbic Acid)又 叫L-抗坏血酸,是一种水溶性维生素。食物 中的维生素C被人体小肠上段吸收。一旦吸 收,就分布到体内所有的水溶性结构中, 正常成人体内的维生素C代谢活性池中约有 1500mg维生素C,最高储存峰值为3000mg 维生素C。 2 ? 胶原蛋白的合成:胶原蛋白的合成需要维生素C参加, ? 治疗坏血病 ? 预防牙龈萎缩、出血:牙龈是软组织,当缺乏蛋白质、钙、VC 时易产生牙龈萎缩、出血。 ? 预防动脉硬化:可促进胆固醇的排泄,防止胆固醇在动脉内壁沉 积,甚至可以使沉积的粥样斑块溶解。 ? 抗氧化剂:可以保护其它抗氧化剂,如维生素A、维生素E、不 饱和脂肪酸,防止自由基对人体的伤害。 ? 治疗贫血:使难以吸收利用的三价铁还原成二价铁,促进肠道对 铁的吸收,提高肝脏对铁的利用率,有助于治疗缺铁性贫血。 ? 防癌:丰富的胶原蛋白有助于防止癌细胞的扩散;VC的抗氧化 作用可以抵御自由基对细胞的伤害防止细胞的变异;阻断亚硝酸 盐和仲胺形成强致癌物亚硝胺。 ? 保护作用:在人的生命活动中,谷胱甘肽和酶保证细胞的完整性 和新陈代谢的正常进行至关重要。 3 ? 酶:谷胱甘肽是由谷氨酸、胱氨酸和甘氨酸组成的短肽, 在体内有氧化还原作用。它有两种存在形式,即氧化型和 还原型,还原型对保证细胞膜的完整性起重要作用。VC 是一种强抗氧化剂,其本身被氧化,而使氧化型谷胱甘肽 还原为还原型谷胱甘肽,从而发挥抗氧化作用。 ? 提高人体的免疫力:白细胞含有丰富的VC,当机体感染 时白细胞内的VC急剧减少。VC可增强中性粒细胞的趋化 性和变形能力,提高杀菌能力。促进淋巴母细胞的生成, 提高机体对外来和恶变细胞的识别和杀灭。参与免疫球蛋 白的合成。提高CI补体酯酶活性,增加补体CI的产生。 ? 促进干扰素的产生,干扰病毒mRNA的转录,抑制病毒的 增生。 ? 提高机体的应急能力:人体受到异常的刺激,如剧痛、寒 冷、缺氧、精神强刺激,会引发抵御异常刺激的紧张状态。 该状态伴有一系列身体,包括交感神经兴奋、肾上腺髓质 和皮质激素分泌增多。肾上腺髓质所分泌的肾上腺素和去 甲肾上腺素是有酪氨酸转化而来,在此过程需要VC的参 与。 4 维生素C在抗病毒和预防病毒性 传染病方面具有很高的应用价 值。如果我们普遍认识到维生 素C预防和治疗病毒传染病症的 原理并且按量服用,就可以预 防很多病毒的传播。 5 目前研究维生素C测定方法的报道 较多,如滴定法、光度分析法、高 效液相色谱法等,各种方法各有特 点。特别是高效液相色谱法是*年 来发展较快的一种方法。 6 测定方法 滴定法测定 分光光度测 高效液相色谱法 维生素C 定维生素C 测定维生素C 7 2,6-二氯酚靛酚滴定法测定维生素C含量 OH OH ? 维生素C能还原2,6二氯酚靛酚染料。 ? 维生素C具有还原性 的烯二醇基,我们通 过氧化还原滴定来测 定维生素C CC 8 O C HO C O HO C HC HO C H C H 2O H 维生素C (还原型) Cl + O Cl OC OCO N OC ==== HC HO CH OH C H 2O H 2,6-二氯酚靛酚 (氧化型,粉红色) 维生素C (氧化型) OH Cl Cl N + OH 2,6-二氯酚靛酚 (还原型) ? 2,6-二氯酚靛酚染料的钠盐在水溶液中显蓝色, 在酸性溶液中呈红色,被还原后红色消失。 11 碘量法 ? 原理:由于维生素C分子中的烯二醇基有极强 的还原性,能被碘氧化,用碘滴定VC ? EC6H6O6/C6H8O6=0.18 ,EI2/I-=0.535 ? 终点:淀粉为指示剂,溶液出现稳定的蓝色即 为终点 ? 反应式: 12 ? 注意 ! 测定时:加HAC使溶液呈弱酸性 ? 原因: ? (1) Vc还原性很强,在空气中很容易被氧 化,在碱性介质中更甚 ? (2)I2在碱性介质中会发生歧化反应 ? 加HAC可减少VC的副反应,避免实验误 差 13 电位滴定法 ?原理:根据滴定过程中电池 电动势的变化来确定反应终 点. ? Pt为指示电极,甘汞作参比 电极 ? E池=E+-E-+E液接电位=EI2/I+k(常数) 14 电位滴定法 ?右图:电位滴定法基 本仪器装置 ? 计算式:(与碘量法相 同) ? Wvc=C(I2)V(I2)M(vc)/ m(vc ) *100% ? 优点: ? 解决了滴定分析中遇 到有色或浑浊溶液时 无法指示终点的问题 15 2,4一二硝基苯肼分光光度法 ? 原理: ? 维生素C在空气中尤其在碱性介质中极易被 氧化成脱氢抗坏血酸 ? 反应式: 16 HH HO O O HO C CC C H HH OO C C OO H ? pH>5,脱氢抗坏血酸内环开裂,形成二酮 古洛糖酸 ? 二酮古洛糖酸 17 ? 脱氢抗坏血酸,二酮古洛糖酸均能和2,4-二硝 基苯肼生成可溶于硫酸的脎 ? 脎在500nm波长有最大吸收 ? 脎的结构: H R CN N RCNN H 18 分光光度法 ? 样品溶液与VC标准溶液按上述方法同样处 理 ? 500nm处测吸光度 ? 下图:721型分光光度计 19 差示旋光法 选定pH为 2.2和6.2 22 2)差示旋光度与溶液浓度关系 吸取2.0、4.0、8.0、16.0、20.0mL的维生素C标准液各 两份,分别置于50mL的容量瓶,一份用pH2.2的盐酸盐缓冲 液定容;一份用pH6.2的磷酸盐缓冲液定容,静置3min后, 用220mm测定管,以前者为空白,测定后者的差示旋光 度(△a)。 文献结果:线性方程为△a=0 205*C+ 0.05,r=0.9964 3)辅料干扰试验 取混合辅料20mg(淀粉、硬脂酸镁、EDTA、糊精等按 处方比例混匀)两份分别



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